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GPCR靶點細胞

Class A（Rhodopsin） Class B1（Secretin） Class C（Glutamate） Orphan and other 7TM Parental Cell Combination

免疫治療

Fc Effector T Cell Activation Co-Stimulatory Co-Inhibitory Other Immune Checkpoint Combination Cytokine&Growth Factor TAA TLR STING PROTAC Other

TAA（Mouse Model）

5T4 ADAM9 ASCT2 B7H3 B7H4 BCMA CD123 CD138 CD166 CD19 CD20 CD22 CD228 ENPP3 EpCAM CD24 CD30 CD33 CD38 CD44 CD46 CD47 CD54 CD56 CD7 CD70 CD73 CD74 CD79 CDCP1 CDHs CEACAMs CLDNs CLEC12A DDR1 DLLs DLK1 EpCAM ERBBs FAP FGFR FRα GPC1 GPC3 GPRC5D GPA33 GUCY2C IL2R Integrin ITGA4 KLK2 KK-LC-1 LILRBs LGR5 LRRC15 LY6E LY6G6D NTSR1 MET MSLN MUCs Nectin4 OVA PDL1 PSMA PTK7 RORs SEZ6 SLC34A2 SLC39A6 SORT SSTR2 STEAP1 STEAP1&PSMA STEAP2 TF TFRC TROP2 TM4SF1 VEGF

激酶靶點

AKT AXL BCR-ABL1 BTK BRAF c-Kit CLIP1-LTK CSF1R CSF3R EGFR EML4-ALK ERBB4 ETV6-ARG ETV6-KDR FGFRs FLT3 HER2 JAK2 KRAS MET NTRKs PDGFRA PIMs RET ROS1 Control

示蹤細胞

腸肺肝淋巴卵巢腦膀胱皮膚前列腺乳腺舌骨骨髓腎胃血液咽胰腺子宮

耐藥細胞

阿霉素多西他賽/紫杉醇氟維司群吉非替尼卡博替尼康士得克卓替尼賽沃替尼順鉑他莫昔芬 Dxd 喜樹堿長春新堿 DS-8201a 長期雌激素缺乏甲氨蝶呤氟尿嘧啶其他耐藥細胞

信號調控

信號調控細胞質粒

其他細胞

BCL2 DDR DMPK Ion Channel Nuclear Receptor SARS COV2 Spike Transporter Other cell models

試劑耗材

熒光素酶檢測試劑盒 TR-FRET試劑 cAMP 檢測試劑盒耗材

示蹤細胞

前言

動物模型實驗是藥物研發和生物醫學研究不可或缺的手段，在新藥試驗、疾病診斷、藥物與醫療器械安全性研究等領域被廣泛使用，通過動物實驗，可取得真實可靠的研究數據。

活體成像原理

活體成像技術方法主要分為生物發光和熒光兩種：生物發光技術主要是用熒光素酶(Luciferase)標記細胞，而熒光技術是用熒光蛋白(如GFP,RFP等)對細胞進行標記。兩種方法各有優缺點：
生物發光活體成像是指在小的哺乳動物體內利用熒光素酶基因表達所產生的熒光素酶蛋白與其小分子底物熒光素在氧、Mg2+離子存在的條件下消耗ATP發生氧化反應，將部分化學能轉變為可見光能釋放，在體外利用敏感的CCD設備形成圖像。該方法靈敏度高，特異性強，無自發光，背景低，不需要光照激發，它也有不足之處：波長依賴性的組織穿透能力，血紅蛋白是吸收光子的主要物質;每次成像前需要給動物麻醉和注射熒光素酶(Luciferase)底物，會增加人力和試劑成本，底物在體內的分布與藥代動力學會影響發光信號。常用的熒光素酶底物：

Name
D-Luciferin Firefly,free acid	D-熒光素，游離酸
D-Luciferin Sodium salt	D-熒光素鈉鹽
D-Luciferin Potassium salt	D-熒光素鉀鹽
L-Luciferin,potassium salt	L-熒光素鉀鹽
Fluorescamine	熒光胺
Coelenterazine	腔腸素

熒光活體成像技術是通過激發光將細胞標記的熒光基團激發到達高能量狀態，而后產生發射光。考慮到不同熒光物質的發射光譜和激發光譜不同，需要成像設備具備相應激發光源和發射濾片。該方法對設備和試劑要求較低，熒光蛋白可選擇標記多種顏色，熒光蛋白穩定性強，缺點是靈敏度較低，需要外源光照激發，非特異性熒光產生的背景噪音使其信噪比和靈敏度遠低于生物發光，激發光對動物有一定影響。

總的來說，現有的活體成像技術方法各有優勢，在腫瘤相關的應用領域，生物發光（Luciferase）活體成像技術的使用更為廣泛，具有重要的應用價值。

示蹤細胞的構建與使用

活體成像技術的應用過程中，示蹤細胞選擇和標記非常關鍵，示蹤細胞構建過程如下：

1. 選擇符合實驗需求和成瘤性指標的母細胞，需要采用來源正確，成瘤性良好，傳代次數較低，狀態保持良好的細胞株作為母細胞；

2. 選擇適合的標記蛋白，常用的標記蛋白有Firefly Luciferase，GFP，EGFP, RFP, YFP等；

3. 選擇標記蛋白表達載體和基因導入方式（常用慢病毒方式），篩選穩定細胞株；

4. 示蹤細胞體外發光測試，測定發光信號強度和細胞傳代信號穩定性，確保示蹤細胞在體外和體內都能穩定高水平表達標記蛋白，以科佰生物A549-Luc細胞為例：

5. 根據實驗需要通過尾靜脈注射、皮下移植、原位移植等方法在動物體內接種已標記的示蹤細胞。

6. 活體成像：動物經麻醉（氣麻/針麻）后放入成像暗箱平臺，開啟照明燈（明場）拍攝背景圖。關閉照明燈，在沒有外界光源的條件下（暗場）拍攝由小鼠體內發出的特異性光子。明場與暗場的背景圖疊加后可以直觀的顯示動物體內特異光子的部位和強度，完成成像操作。值得注意的是熒光成像需要選擇合適的激發光和發射光濾光片，生物發光則需要成像前注射luciferase底物。

7. 數據處理：動物活體成像圖像處理軟件除了提供含有光子強度標尺的成像圖片外，還能計算分析發光面積、總光子數、光子強度的相關參數供實驗者參考。

應用介紹

1.長期動態檢測腫瘤的生長，并可建立相應的動物模型進行抗腫瘤藥物的篩選。動物體內藥效實驗示例：